Especificações de Streptavidin 丨 9013-20-1
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Propriedade |
Especificação |
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Aparência |
Pó branco a esbranquiçado |
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Ativo |
15,6 u/mg min (proteína) (R-CSA: Biotin=1: 4 (mol: mol)) |
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Ensaio (por SDS-PAGE) |
95% min |
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Endotoxina |
5 EU/mg máx |
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Fonte |
Escherichia coli |
Informações de transporte de Streptavidin 丨 9013-20-1
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Parâmetro |
Especificação |
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Número da ONU |
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Aula |
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Grupo de embalagem |
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Código HS |
3504009000401 |
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Estabilidade e reatividade |
Armazene em -20 grau para -80 grau antes da reconstituição. |
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Armazenar |
Bem fechado. Armazene em um local fechado, seco e ventilado |
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Condição para evitar |
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Pacote |
Introdução
Streptavidin 丨 9013-20-1 é uma proteína derivada da bactériaStreptomyces Avidinii, e possui aplicações significativas em vários campos, como bioquímica, biologia molecular, diagnóstico e biotecnologia devido à sua forte afinidade pela biotina. Abaixo estão algumas aplicações e benefícios importantes da Streptavidin:
1. Biologia Molecular e Bioquímica
● Vidadiga de biotina-estreptavidina: estreptavidina 丨 9013-20-1 O recurso mais notável é sua capacidade de se ligar à biotina (vitamina H) com afinidade extremamente alta (constante de dissociação KD de aproximadamente 10^-14 m). Essa interação forma a base para muitas aplicações na biologia molecular, como moléculas biotiniladas (como sondas, anticorpos ou ácidos nucleicos) podem ser capturados ou detectados usando superfícies revestidas com estreptavidina.
● Imuno -histoquímica (IHC) e imunocitoquímica (ICC): A estreptavidina é amplamente utilizada nas técnicas de IHC e ICC para visualizar antígenos em amostras de tecido e células. Ao rotular anticorpos biotinilados com um anticorpo secundário conjugado a uma enzima (como peroxidase de rábano ou fosfatase alcalina), os pesquisadores podem amplificar o sinal para melhorar a detecção sob um microscópio.
● Western blotting e ELISA: em técnicas como Western blotting e ensaio imunossorvente ligado a enzimas (ELISA), a estreptavidina é usada como um reagente secundário para detectar ou quantificar proteínas. Em ELISA, por exemplo, um anticorpo primário biotinilado está obrigado a placas revestidas com estreptavidina, e a detecção do antígeno ligado é facilitada usando uma enzima ou fluorescência conjugada por estreptavidina ou fluorescência.
● Cromatografia por afinidade: A estreptavidina é frequentemente usada em colunas de cromatografia de afinidade para isolar biomoléculas biotiniladas, incluindo proteínas, peptídeos e ácidos nucleicos. A alta afinidade da estreptavidina pela biotina permite uma purificação altamente seletiva e eficiente de moléculas -alvo.
2. Diagnóstico e detecção
● Ensaios de diagnóstico baseados em biotina-streptavidina: Streptavidin 丨 9013-20-1 é um componente crítico em uma variedade de kits de diagnóstico, incluindo aqueles para detecção de doenças infecciosas, biomarcadores de câncer e níveis hormonais. A interação biotina-estreptavidina é usada em ensaios como testes de fluxo lateral (por exemplo, testes de gravidez) ou em plataformas de diagnóstico mais complexas, como ensaios baseados em contas.
● Imunoensaios: Em imunoensaios, a estreptavidina é usada para capturar anticorpos ou antígenos biotinilados em suportes sólidos (por exemplo, contas magnéticas ou placas de microtitulação). Isso fornece um meio robusto e reprodutível de detectar analitos em amostras complexas.
● Biossensores à base de nanopartículas: a estreptavidina pode ser conjugada com nanopartículas, que podem ser usadas em biossensores para a detecção de moléculas biotiniladas. Este aplicativo é especialmente valioso em diagnósticos rápidos ou dispositivos de ponto de atendimento.
3. Biotecnologia e Engenharia Genética
● Etiqueta de proteína: Streptavidin 丨 9013-20-1 é freqüentemente usada na engenharia genética para rastrear, purificar ou detectar proteínas que são marcadas com biotina. Uma estratégia comumente usada é a criação de proteínas recombinantes com etiquetas de biotinilação, que podem ser isoladas ou detectadas usando resinas ou contas revestidas com estreptavidina.
● Entrega de genes: os sistemas baseados em estreptavidina foram explorados para a entrega de genes, onde vetores biotinilados (como plasmídeos ou nanopartículas) podem ser capturados e entregues com eficiência para células-alvo usando superfícies ou nanopartículas funcionalizadas com estreptavidina.
● Biotinilação de ácidos nucleicos: em estudos de expressão gênica, os ácidos nucleicos (como RNA ou DNA) são frequentemente biotinilados para facilitar sua detecção ou purificação. A estreptavidina é usada para capturar esses ácidos nucleicos biotinilados para análise, incluindo o estudo da expressão gênica ou a identificação de interações entre diferentes moléculas de ácido nucleico.
4. Aplicações terapêuticas
● Entrega de medicamentos direcionados: A estreptavidina tem potencial nos sistemas direcionados de administração de medicamentos, especialmente na terapia do câncer. Medicamentos biotinilados ou agentes terapêuticos podem ser especificamente direcionados para células que expressam receptores de biotina, ou partículas conjugadas com estreptavidina podem transportar medicamentos para o local alvo. Isso oferece a possibilidade de melhorar a especificidade e reduzir os efeitos colaterais nos tratamentos.
● Desenvolvimento da vacina: as tecnologias baseadas em estreptavidina foram exploradas no desenvolvimento da vacina. Os antígenos biotinilados podem ser exibidos em nanopartículas conjugadas com estreptavidina para melhorar a resposta imune e a eficácia das vacinas.
5. Estudos de interação proteína-proteína
● Ensaios de puxamento: A estreptavidina é comumente usada em ensaios de pull-down para estudar interações proteína-proteína. Nesses ensaios, uma proteína de interesse é biotinilada e incubada com um cordão ou superfície revestida com estreptavidina. Isso permite a captura da proteína biotinilada e quaisquer proteínas interagentes para análises adicionais, como por espectrometria de massa ou Western blotting.
● Co-imunoprecipitação (CO-IP): em experimentos de co-IP, anticorpos ou proteínas biotinilados são usados para puxar parceiros interagentes de misturas complexas, com a estreptavidina servindo como agente capturado. Isso é particularmente útil no mapeamento de redes de sinalização celular ou complexos de proteínas.
6. Vantagens de Streptavidin
● Alta afinidade pela biotina: a estreptavidina se liga à biotina com uma afinidade excepcionalmente alta, o que permite baixos limites de detecção e desempenho robusto em ensaios.
● Sem reatividade cruzada: ao contrário da avidina, a estreptavidina possui uma reatividade cruzada mínima com outras proteínas, o que reduz o ruído de fundo em ensaios e aumenta a especificidade da ligação.
● Estabilidade: a estreptavidina 丨 9013-20-1 é altamente estável e pode funcionar efetivamente em uma ampla gama de temperaturas e níveis de pH, tornando -o adequado para uso em diversas condições experimentais.
● Versatilidade: A estreptavidina pode ser facilmente conjugada com vários marcadores, como enzimas, fluoróforos ou nanopartículas, permitindo diversos métodos de detecção em uma ampla gama de configurações experimentais.
7. Limitações e considerações
● Ligação não específica: em alguns casos, a estreptavidina pode exibir ligação não específica a superfícies ou outras proteínas, especialmente quando usadas em altas concentrações. É necessária uma otimização cuidadosa para minimizar esses efeitos.
● Requisitos de biotinilação: as aplicações de estreptavidina dependem da disponibilidade de moléculas biotiniladas, que podem exigir etapas adicionais para rotulagem e funcionalização.
Conclusão
Streptavidin 丨 9013-20-1 é uma ferramenta poderosa nos campos da biologia molecular, diagnóstico, biotecnologia e aplicações terapêuticas. Sua afinidade de ligação excepcional para a biotina permite seu uso em uma ampla variedade de ensaios, incluindo aqueles para detecção de proteínas, purificação e estudos de interação. Os sistemas baseados em estreptavidina continuam cruciais no avanço dos sistemas de pesquisa, diagnóstico e administração de medicamentos, com muitas aplicações se beneficiando de sua alta especificidade, estabilidade e versatilidade.
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